不同浓度Aβ25～35对小胶质细胞上RAGE/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨不同浓度β-淀粉样蛋白(Aβ)25～35对小胶质细胞上晚期糖基化终末产物受体(RAGE)/核因子(NF)-κB信号通路的影响.方法 不同浓度Aβ25～35(0、1、5、10及15μmol/L)与BV2共孵育48 h后显微镜下观察BV2细胞的形态变化,并检测细胞活性(MTT法),同时检测上清液白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平及上清液中Aβ25～35剩余量,免疫细胞化学(ICC)、Western印迹(WB)法检测BV2上晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、核因子(NF)-κB蛋白的变化.结果 随Aβ25～35浓度梯度性增大,细胞形态发生明显变化,0μmol/L浓度组BV2处于静息状态,1、5μmol/L浓度组BV2伸出伪足呈阿米巴样的吞噬细胞状态,10、15μmol/L组呈巨噬细胞形态,但数量明显减少.1、5μmol/L组BV2细胞清除Aβ25～35的量逐渐增多,10、15μmol/L浓度的BV2对Aβ25～35的清除量明显降低(P<0.05),同时10、15μmol/L组BV2活性显著降低(P<0.05);随着Aβ25～35浓度呈梯度性增加,上清液中IL-1β、TNF-α水平不断升高,10及15μmol/L浓度组IL-1β、TNF-α明显高于5μmol/L组(P<0.05);10、15μmol/L浓度组RAGE及NF-κB细胞膜阳性反应面积、表达量较5μmol/L浓度组显著增加(P<0.05).结论 10μmol/L浓度的Aβ25～35可使BV2细胞活性降低,对Aβ25～35的清除能力减低,其机制可能与高浓度Aβ25～35引起BV2上RAGE蛋白上调、NF-κB信号通路被激活有关.