siRNA下调S100A4基因表达对人胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响
Chinese Journal of Gerontology(2018)
Abstract
目的 探讨应用小干扰RNA(siRNA)下调人胶质瘤U251细胞中S100A4基因表达和对U251细胞增殖及凋亡的影响.方法 脂质体法 U251细胞转染化学合成的针对 S100A4基因的特异性 siRNA,RT-PCR 和 Western 印迹方法分别检测S100A4 mRNA和蛋白表达水平.分别应用CCK-8法、流式细胞术和酶标仪检测下调S100A4表达对U251细胞增殖、凋亡能力及细胞内含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3活性的影响.结果 与正常对照组和阴性对照组比较,siRNA转染48 h后,siR-NA-S100A4组细胞中S100A4 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),U251细胞的增殖受到抑制,细胞凋亡率明显增加(P<0.05),且沉默S100A4表达可以上调caspase-3活性(P<0.01).结论 S100A4 siRNA能有效下调S100A4基因的表达,抑制U251细胞的增殖,诱导细胞凋亡,参与脑胶质瘤的生物学行为.
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