虾青素联合人羊膜间充质干细胞移植治疗去卵巢大鼠骨质疏松

目的 探讨虾青素联合人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植对去卵巢大鼠骨质疏松的影响.方法 体外培养hAMSCs,选择雌性未孕的Wistar大鼠60只,完全随机分为假手术组、模型组、hAMSCs移植组及联合组(虾青素+hAMSCs移植),每组各15只.模型组、hAMSCs移植组及联合组行双侧卵巢切除,假手术组不切除卵巢.造模后1 w于hAMSCs移植组尾静脉注射浓度为2×106 L-1的hAMSCs细胞悬液20μl,联合组尾静脉注射等量hAMSCs细胞悬液+虾青素20 mg/kg灌胃给药,假手术组、模型组尾静脉注射等量的0.9％氯化钠注射液,连续干预12 w.分别于造模后的1、3、6、12 w检测各组大鼠的体质量变化;通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测骨代谢指标:血清Ⅰ型前胶原氨基末端肽(PINP)、血清骨碱性磷酸酶(BAP)、尿脱氧吡啶啉(DPD)的含量变化;干预12 w后采用RT-PCR及Western印迹技术检测骨组织中骨形成蛋白(BMP)-4及护骨素(OPG)mRNA和蛋白表达.结果假手术组大鼠体重增长符合动物自然生长规律,而模型组于造模后3 w开始增长,且体重明显高于假手术组,hAMSCs移植组及联合组体重渐增,其中联合组增长幅度接近假手术组.模型组DPD明显高于假手术组,hAMSCs移植组和联合组较模型组明显降低,联合组又明显低于hAMSCs移植组(均P<0.05),联合组与假手术组比较差异无统计学意义,表明大鼠去卵巢作用被扭转.hAMSCs移植组及联合组BAP明显高于模型组(P<0.05),提示成骨活动增强,与假手术组比较,模型组PINP明显降低,hAMSCs移植组和联合明显升高(P<0.05),提示成骨活动加强.与假手术组比较,模型组骨组织BMP-4及OPG mRNA和蛋白表达水平明显下降,与模型组比较,hAMSCs移植组和联合组明显升高,联合组升高幅度较hAMSCs移植组更明显(均P<0.05).结论 hAMSCs移植对去卵巢骨质疏松大鼠具有治疗作用,与虾青素联合可更好发挥作用.