siRNA靶向沉默hTERT基因对宫颈癌Caski细胞特性的影响

目的 研究siRNA靶向沉默hTERT基因后对宫颈癌Caski细胞特性的影响.方法 设计、合成特异性针对hTERT mRNA的siRNA,将其克隆入pGenesil-1.1质粒中,重组成hTERT mRNA-siRNA的表达载体,导致目的基因沉默,是由电转染入宫颈癌Caski细胞,从而产生RNA干扰作用.应用Western印迹法及RT-PCR法检测沉默hTERT基因后对于宫颈癌Caski细胞的蛋白及mRNA的表达情况;检测细胞周期运用流式细胞仪;沉默hTERT基因后宫颈癌Caski细胞的增殖能力可通过CCK-8 增殖实验检测.沉默hTERT基因后宫颈癌Caski细胞的侵袭能力可通过小室侵袭实验检测.结果 hTERT基因沉默48 h以后,与空白组及未转染组相比,转染组宫颈癌Caski细胞的蛋白及mRNA表达出现明显降低(P<0.05);细胞周期的检测结果显示S期的细胞数目明显减低,转染组的宫颈癌Caski细胞停留于G0/G1周期,空白组、转染组及未转染组相比差异显著(P<0.05);宫颈癌Caski细胞在转染组的增殖过程中被明显抑制(P<0.05);转染组穿过滤膜的细胞数量明显减少(P<0.05).结论 Si RNA靶向沉默hTERT基因电转染后,使宫颈癌Caski细胞的增殖和迁移能力得到抑制,一定程度上改善了宫颈癌患者的预后.