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miRNA-206靶向细胞周期蛋白D2调控神经胶质瘤细胞增殖

wf(2016)

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Abstract
目的:探讨miRNA-206在神经胶质瘤组织中的表达及其对神经胶质瘤细胞增殖的影响。方法采用荧光定量 PCR方法检测神经胶质瘤组织和细胞系中miRNA-206的表达情况;通过四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)增殖实验检测miRNA-206对神经胶质瘤细胞T98G增殖的影响;生物信息学方法预测miRNA-206可能的靶基因,并采用荧光素酶报告基因实验验证预测的细胞周期蛋白D2(CCND2)是miRNA-206的靶基因;蛋白质印迹方法检测miRNA-206对CCND2表达的影响。结果 miRNA-206在神经胶质瘤组织中的表达显著降低( P<0.01),且神经胶质瘤恶性度越高, miRNA-206的表达越低(P<0.01);同时,神经胶质瘤细胞系中miRNA-206的表达亦显著降低(P<0.01);转染miRNA-206 mimics上调神经胶质瘤细胞T98G中miRNA-206表达后可显著抑制神经胶质瘤细胞T98G的增殖能力(P<0.01),而转染anti-miRNA-206可增加神经胶质瘤细胞T98G的增殖能力(P<0.01)。通过TargetScan软件进行生物信息学预测显示CCND2为miRNA-206的功能性靶基因,且得到荧光素报告实验结果证实。蛋白质印迹结果显示转染miRNA-206可显著抑制神经胶质瘤细胞T98G中CCND2的表达。结论 miRNA-206可通过调节CCND2的表达,进而抑制神经胶质瘤细胞T98G的增殖能力,神经胶质瘤组织中miRNA-206的低表达与神经胶质瘤的发生发展密切相关。
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