老年糖尿病肾病患者转化生长因子β1基因表达调控区甲基化改变及机制

目的：观察老年糖尿病肾病患者转化生长因子（ TGF）β1基因表达调控区甲基化改变情况，探讨甲基化在糖尿病肾病发病机制中的作用。方法老年2型糖尿病患者182例，分为单纯糖尿病组84例、糖尿病肾病组98例，选取同期体检的老年健康志愿者60名为健康对照组。提取3组外周血基因组DNA，进行亚硫酸氢盐修饰处理。采用甲基化特异性PCR技术初筛3组TGF-β1基因表达调控区DNA甲基化人群，用亚硫酸氢盐修饰后测序技术检测3组TGF-β1基因表达调控区DNA甲基化水平。 ELISA法检测3组血清 TGF-β1蛋白表达水平；分析糖尿病肾病组 TGF-β1蛋白表达相关影响因素。结果单纯糖尿病组和糖尿病肾病组TGF-β1基因第一外显子区甲基化比例均明显低于健康对照组（ P＜0.05），糖尿病肾病组与单纯糖尿病组相比进一步降低。单纯糖尿病组甲基化水平明显低于健康对照组（ P＜0.05）；糖尿病肾病甲基化水平明显低于健康对照组和单纯糖尿病组（P＜0.05）。单纯糖尿病组和糖尿病肾病组TGF-β1蛋白水平均明显高于健康对照组（P＜0.05）；糖尿病肾病组与单纯糖尿病组相比进一步升高。血清TGF-β1蛋白表达水平与UACR、BUN、Scr、FBS、PBS呈明显正相关，与eGFR、基因甲基化呈明显负相关。进一步多元逐步回归分析显示，eGFR和基因甲基化与血清TGF-β1蛋白表达水平存在明显相关性，是影响 TGF-β1表达的因素。血清 TGF-β1蛋白表达水平与病理分级呈明显正相关；糖尿病肾病组12个CpG位点甲基化含量与病理分级相关。结论 TGF-β1基因表达调控区甲基化是高糖诱导系膜细胞TGF-β1基因表达激活的重要机制，参与老年糖尿病肾病的发生与发展。