乳兔单一左心房肌细胞原代培养及鉴定

目的：探讨分离、纯化、培养并鉴定乳兔单一左心房肌细胞的实验方法。方法取出生48 h内乳兔左心房，用0．1％胰酶加0．1％Ⅱ型胶原酶混合消化，将消化的细胞经两次差速贴壁，再加入5－溴脱氧尿嘧啶核苷抑制成纤维细胞生长进行纯化。计算酶消化后细胞存活率；倒置显微镜下观察左心房肌细胞贴壁生长状况、形态学变化等；绘制细胞生长曲线；鉴定左心房肌细胞纯度。结果消化后细胞存活率平均为85．2％；在倒置显微镜下观察，证实培养的左心房肌细胞能在较长时间内保持较高的活力；2～5 d为左心房肌细胞对数生长期，5 d后进入平顶期；左心房肌细胞经鉴定纯度达95％。结论采用混合酶消化法可以获得纯度高，在一定时间内具有较高活力的单一左心房肌细胞。