脂联素及其受体对血管内皮细胞一氧化氮合酶活性差异调节的分子机制
Journal of Clinical Cardiology(2015)
Abstract
目的:探讨脂联素Ⅰ型及Ⅱ型受体(AdipoR1和AdipoR2)在内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性调节中的作用.方法:采用随机数字表法,将体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)随机分为对照组、脂联素组、脂联素+ siRNA-adipoR1组、脂联素+siRNA-adipoR2组和脂联素+L-NAME组.使用siRNA分别沉默AdipoR1和AdipoR2受体基因,Western blot方法检测脂联素作用下磷酸化eNOS的表达情况.结果:不同浓度(0、5、10和15 μg/ml)以及不同时间(0、15、30和60 min)脂联素干预内皮细胞,eNOS磷酸化水平不同,浓度为5 μg/ml干预15 min时,磷酸化的eNOS蛋白表达最多(P<0.05).特异性siRNA-adipoR1沉默AdipoR1基因而抑制其表达(P<0.01),脂联素对内皮细胞eNOS的磷酸化水平明显降低(P<0.05).相反,AdipoR2的表达被siRNA-ad-ipoR2抑制(P<0.01),脂联素作用于内皮细胞时,eNOS的磷酸化水平无明显变化.NOS抑制剂L-NAME阻断NO的形成,脂联素引起内皮细胞eNOS磷酸化作用降低,磷酸化eNOS蛋白表达量减少(P<0.05).结论:脂联素通过AdipoR1影响内皮细胞eNOS的活性,促进eNOS的磷酸化(ser1177)及NO的分泌,维持正常内皮细胞的功能.
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human umbilical vein endotheliel cell,adiponectin receptor1,nitric oxide synthase,phosphorylation,endothelial function
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