C6orf120基因敲除大鼠的制备及基因型鉴定

目的 建立稳定的C6orf120基因敲除SD大鼠模型,观察基因敲除对大鼠生长发育的影响,探索该基因的功能及其在肝脏损伤中的作用.方法 采用TALEN基因敲除技术敲除基因C6orf120,获得杂合子(C6orf120+/-)大鼠,将C6orf120+/-大鼠进行杂交后获得纯合子(C6orf120-/-)大鼠.采用DNA Analyzer 3730XL测序技术对大鼠的基因型进行鉴定.观察子代大鼠的表型变化及对大鼠子代生育情况进行统计.随机处死8周龄C6orf120-/-大鼠和野生型(wild type,WT)大鼠,留取大鼠的心、肝、脾、肺、肾、胸腺、淋巴组织,通过Western blotting技术检测C6off120蛋白在大鼠各组织的表达情况.结果 获得了稳定遗传的C6orf120-/-基因型大鼠.Western blotting技术证明基因C6orf120在C6orf120-/-大鼠体内全部删除,而C6orf120蛋白主要在WT大鼠的肝组织中高表达,在脾脏高表达,在肺、胸腺、淋巴组织中低表达.观察发现,WT大鼠和C6orf120-/-大鼠的外观和行为表现上差异无统计学意义.对子代大鼠性别进行观察发现,C6orf120-/-大鼠的雌性数量明显多于雄性.结论 C6off120基因敲除大鼠模型成功构建,该模型的构建为探索该基因在肝损伤中作用奠定了基础.C6orf120基因可能参与大鼠的生长发育过程.