miR-497-5p靶向沉默核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白1促进巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出

目的 观察miR-497-5p对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白1(NLRP1)靶向调控及其对细胞胆固醇流出的影响.方法 生物信息学与荧光素酶报告基因验证miR-497-5p与NLRP1靶向结合.人源THP-1单核细胞经佛波酯及氧化低密度脂蛋白处理后成为泡沫细胞.使用miR-497-5p mimic和miR-497-5p inhibitor处理细胞.实时荧光定量PCR和Western blot检测NLRP1、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达情况.酶联免疫吸附法测定细胞培养液白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18含量.液体闪烁计数仪检测泡沫细胞胆固醇流出水平.高效液相色谱法检测泡沫细胞内脂质含量.结果 miR-497-5p mimic能够显著性降低野生型NLRP13'UTR报告基因的荧光素酶活性.与对照组相比,miR-497-5p mimic组NLRP1、ASC、Caspase-1的mRNA及蛋白表达水平明显下调,IL-1β3和IL-18分泌明显减少.miR-497-5p mimic较对照组显著促进细胞胆固醇流出,减少细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量.结论 miR-497-5p可能通过靶向调控NLRP1,抑制巨噬细胞源性泡沫细胞炎症反应并促进胆固醇流出.