RNA干扰下调ACE和AT1R对自发性高血压大鼠血压及脑组织损伤的影响

目的 用RNA干扰下调血管紧张素转换酶(ACE)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R),观察其对自发性高血压大鼠(SHR)血压及脑组织损伤的影响.方法 SHR随机分为5组:空白对照组、病毒对照组、Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组,同时设WKY正常血压对照组.各组大鼠均于实验第1、17天各注射1次,干预前后检测血压、心率的变化.于首次注射后第3天,酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织中ACE、AngⅡ含量,实时荧光定量PCR检测脑组织ACE mRNA、AT1R mRNA表达,Western blot检测脑组织ACE、AT1R蛋白表达.实验结束时做脑组织光镜病理检查观察脑结构.结果 于首次注射后第3天,Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1 R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1 R-shRNA治疗组尾动脉压分别下降25.2±5.3 mmHg、23.5±4.8 mmHg、27.1±6.4 mmHg,第14天分别下降24.4±5.6 mmHg、23.6±4.9 mmHg、26.3±6.9 mmHg,第17天时血压有所回升;第2次注射后Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1 R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1 R-shRNA治疗组尾动脉压再次明显下降,第23天时较首次注射前分别下降40.2±4.5 mmHg、37.8±3.9 mmHg、43.7±7.3 mmHg,第37天时血压有所回升,第40天时血压上升至第2次注射前水平;空白对照组和病毒对照组血压则持续升高26 mmHg,两组比较差异无统计学意义;正常血压对照组尾动脉压无明显变化.Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1 R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1 R-shRNA治疗组脑组织ACE、AngⅡ显著低于空白对照组和病毒对照组(P＜0.05),而与正常血压对照组比较差异无统计学意义.Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1 R-shRNA治疗组脑组织ACE mRNA和Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1 R-shRNA治疗组脑组织AT1R mRNA的表达明显低于空白对照组、病毒对照组(P＜0.05),而与正常血压对照组比较差异无统计学意义.Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1 R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1 R-shRNA治疗组脑组织AT1R蛋白表达显著低于空白对照组、病毒对照组(P＜0.05).光镜显示Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1 R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1 R-shRNA治疗组脑组织结构明显改善.结论 RNA干扰下调ACE和AT1R表达,降低SHR血压并改善脑损伤,尤以Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组效果明显且副作用少.RNA干扰对高血压的基因治疗具有良好应用前景.