基于NOD2信号通路探讨NADPH抑制剂对肾脏缺血再灌注损伤的影响

目的 基于抑制核苷酸寡聚化结构域蛋白-2 (nucleotide-binding oligomerization domain-2,NOD2)信号通路,探讨NADPH抑制剂对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,IRI)的影响及作用机制.方法 将雄性Wistar大鼠切除右肾,并随机分为4组:①肾脏缺血再灌注(I/R)组:给予等量生理盐水预处理后夹闭左肾动脉制备IRI模型;②I/R组+氯化二碘联苯(diphenylene iodonium,DPI)组:给予DPI预处理后夹闭左肾动脉制备IRI模型;③I/R组+4-羟基-3甲氧基苯乙酮(4-hydroxy-3-methoxyacetophenone,Apocynin)组:给予Apocynin预处理后夹闭左肾动脉制备肾脏IRI模型;④假手术(Sham)组:给予等量生理盐水处理后不予夹闭左肾动脉.试验结束24 h后收集各组大鼠血及肾组织标本,采用Western blot法分别对NOD2、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、半胱氨酸蛋白酶(Caspase-1)的表达进行检测;采用实时定量PCR法对NOD2 mRNA的表达进行检测;采用HE染色法观察肾脏组织学改变;采用免疫组织化学法检测肾组织炎症因子IL-1β的表达.结果 与Sham组比较,I/R组的大鼠肾组织NOD2、NF-κcB蛋白、Caspase-1表达显著增加(P＜0.05);NOD2 mRNA表达显著增加(P＜0.05);I/R组肾脏病理表现为肾小管上皮细胞水肿、坏死,脱落于管腔,肾间质炎性细胞浸润,肾小管损伤评分明显增加(P＜0.05).与I/R组相比,I/R+ Apocynin组和I/R+ DPI组的NOD2、NF-κB蛋白、Caspase-1表达均显著减少(P＜0.05),NOD2 mRNA表达显著减少(P＜0.05),肾脏病理显示急性肾小管坏死程度减轻,肾小管损伤评分显著减低(P＜0.05).结论 抑制氧化应激可通过阻断NOD2受体信号通路来减轻肾脏IRI过程.