抑制MET对RAS突变型结肠癌细胞的抗肿瘤作用

目的 探讨抑制MET对于RAS突变结肠癌的体内体外抗肿瘤作用.方法 选取4种常见RAS突变型结肠癌细胞(HCT-116、DLD-1、Lovo和HCT-15),采用siRNA敲除MET蛋白表达,或者加入特异性MET抑制剂PHA-665752,采用MTT及集落形成实验观察抑制MET对结肠癌细胞增殖抑制的作用,应用Western Blotting检测PHA-665752对MET/AKT/ERK信号通路的作用.另外,应用HCT-116细胞系构建裸鼠皮下成瘤模型,给予PHA-665752腹腔注射,观察MET抑制剂对体内肿瘤的抑制作用.结果 RAS突变的4种结肠癌细胞系均有MET蛋白表达.应用siRNA敲除MET蛋白表达对HCT-116和Lovo细胞的增殖抑制作用分别为19.6±4.5％和27.8±5.8％,而应用MET特异性抑制剂PHA-665752对两种细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性,细胞克隆形成实验证实PHA-665752可有效抑制细胞克隆形成.另外,应用HCT-116细胞构建裸鼠皮下成瘤模型,给予PHA-665752单药证实MET抑制剂可明显抑制HCT-116细胞的皮下移植瘤(第四周肿瘤体积:PHA-665752组为300±72 mm3,对照组为608±59 mm3,t=5.731,P=0.005).Western Blotting证实应用PHA-665752预处理能明显抑制HGF激活的p-MET、p-AKT和p-ERK.结论 抑制MET对于RAS突变型结肠癌具有抗肿瘤作用,靶向MET可能成为RAS突变型结肠癌的有效治疗.