海水干预下人肺泡上皮细胞活性氧及内质网应激水平的变化

目的 探讨海水对人肺泡上皮细胞中活性氧(ROS)和内质网应激(ER stress)水平的影响.方法 以含不同浓度海水(20％、40％、60％、80％)的培养液刺激人肺泡上皮细胞系A549细胞1h后更换培养液,3h后CCK-8法检测海水对细胞的毒性;以25％浓度海水刺激A549细胞1h后,不同时间点(2h、4h、6h、8h)应用CCK-8法检测海水对细胞的毒性,Western Blotting法检测内质网应激特异蛋白GRP78蛋白表达情况,DCFH-DA探针检测细胞内活性氧水平变化情况.结果 以不同浓度海水刺激A549细胞时,细胞活性受抑制程度呈明显的浓度依赖性,海水处理组与对照组相比较,差异有统计学意义(P＜0.05);细胞在受到短暂海水刺激后恢复时,细胞活性依然受到明显抑制,在4h抑制最显著,之后逐渐恢复,2h、8h组与0h组相比较,差异无统计学意义(P＞0.05);而4h、6h组与0h组相比较,差异有统计学意义(P＜0.05);同时细胞内活性氧类(ROS)含量增多,内质网应激相关蛋白GRP78表达量增加,且都在4h达到峰值.结论 海水干预可抑制人肺泡上皮细胞增殖活性,而内质网应激和活性氧类参与了海水引起的A549细胞损伤过程.