清热方改善糖尿病肾病大鼠肾小管自噬应激的实验研究
Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Nephrology(2020)
摘要
目的:探讨糖尿病肾病(DN)内热证与肾组织自噬应激的相关性及清热方对DN大鼠肾小管损伤的修复作用.方法:选取经临床肾活检诊断为DN的患者14例为观察者,另取肾活检诊断为轻微病变的轻度蛋白尿或仅有血尿的患者7例作为对照,对每位患者进行中医症状量化评分,并留取肾组织进行微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)免疫组化染色.SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立DN模型,将糖尿病大鼠和非糖尿病大鼠随机分为对照组、糖尿病组(DM)、清热方组和DM+清热方组,对照组及DM组给予生理盐水灌胃,清热方组正常大鼠及DM+清热方组给予清热方水煎剂灌胃,连续给药24周,实验结束后免疫荧光染色方法检测大鼠肾组织LC3-Ⅱ水平,酶联免疫法测定各组大鼠尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和肾损伤分子1(KIM-1)表达水平变化.结果:DN患者热证评分明显高于对照组患者,DN患者肾组织LC3-Ⅱ阳性表达亦明显强于对照组患者;DM组大鼠尿液NGAL、KIM-1水平较对照组显著升高,DM+清热方组大鼠尿液NGAL、KIM-1水平较DM组下降;DM组大鼠肾组织LC3-Ⅱ免疫荧光表达积分较对照组升高,DM+清热方组大鼠肾组织LC3-Ⅱ免疫荧光表达积分较DM组下降.结论:DN患者内热证可能与肾组织自噬应激具有一定相关性,清热方具有改善糖尿病肾病大鼠肾小管损伤的作用,具体机制可能与下调自噬应激密切相关.
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