金荞麦提取物调控DDIT4对肾癌细胞凋亡的影响

目的:探讨金荞麦提取物Fr4对肾癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法:采用不同浓度Fr4处理肾癌细胞786-O,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测786-O细胞中Cyclin D1、P21、Bcl-2、Bax、DDIT4表达.建立过表达DDIT4细胞.在786-O细胞中转染si- DDIT4,并用400 μg/ml Fr4处理,研究786-O细胞增殖、凋亡变化.结果:Fr4明显抑制786-O细胞活性(P＜0. 05),并呈剂量和时间依赖性;不同浓度Fr4显著减少Cyclin D1蛋白表达量,提高P21蛋白水平(P＜0. 05),并呈剂量依赖性. 400 μg/ml的Fr4明显增加细胞凋亡率和Bax、DDIT4蛋白表达量(P＜0. 05),降低Bcl-2蛋白水平.过表达DDIT4显著抑制24 h、48 h、72 h的细胞活性及Cyclin D1、Bcl-2蛋白水平,增加细胞凋亡率、P21和Bax蛋白表达量(P＜0. 05).抑制DDIT4逆转了Fr4对786-O细胞增殖、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达的抑制作用,和对细胞凋亡、DDIT4、P21和Bax蛋白表达的促进作用.结论:金荞麦提取物Fr4通过调控DDIT4表达抑制肾癌细胞增殖,并诱导其凋亡.