不同药性祛风通络方干预下UUO大鼠肾小管上皮细胞TRPV4变化规律研究

目的:通过观察祛风通络方及寒热加味方对UUO模型大鼠肾组织TRPV4表达及功能状态的影响,探索不同药性祛风通络方对TRPV4的调节作用及其对肾间质纤维化的防治机理.方法:挑选SD雄性成年大鼠80只,随机分为空白对照组和模型组,单侧输尿管结扎法建立UUO模型,分为模型对照组、温热大剂量组、温热小剂量组、寒凉大剂量组、寒凉小剂量组、祛风大剂量组、祛风小剂量组,进行药物干预.术后第21天将大鼠全部处死,取术侧肾脏组织,一半用作病理学染色,一半用于分子生物学检测.RT-PCR和Western法检测肾脏组织TRPV4、α-SMA、vimentin mRNA含量变化及蛋白表达情况.结果:(1)造模成功后21 d,模型组及干预组大鼠术侧肾脏体积较对侧增大,剖面肾实质不同程度萎缩,肾盂扩张呈囊状,模型组最为明显.(2)干预各组病理情况均不同程度改善,其中温热小剂量组改善最为明显.(3)温热大剂量组TRPV4 mRNA含量明显增加(P<0.01),其余各组均表现不同程度下降.(4)治疗各组α-SMA mRNA含量均表现不同程度下降(P<0.05),以温热小剂量组下降最为显著(P<0.01),各组Vimentin的表达表现出与α-SMA同样的变化趋势.结论:(1)TRPV4可能通过基因或蛋白水平的上调(下调)感受药性之寒热.(2)祛风通络方及加味方可能延缓肾间质纤维化的进展,且温热小剂量治疗效果最好.