雷公藤甲素对 PAN 致足细胞损伤中 mTOR/p70S6K/4EBP1信号通路的影响?

目的：：探讨雷公藤甲素(triptolide，TP)对 mTOR／ p70S6K／4EBP1信号通路的影响及其保护足细胞的可能机制。方法：氨基核苷嘌呤霉素(puromycin aminonucleoside，PAN)刺激体外培养的足细胞24 h 建立模型。细胞增殖检测试剂盒(CCK -8法)检测不同浓度雷公藤作用下 PAN 损伤足细胞的细胞存活率。后将足细胞随机分组：(1)对照组；(2) PAN 组(PAN 组，PAN 50μg／ ml)；(3)TP 组(PAN 50μg／ ml + TP 10 ng／ ml)，予以相应刺激24 h。采用实时荧光定量 PCR 检测足细胞 mTOR、4EBP1、p70S6K、Akt、synaptopodin mRNA 表达量，western blot 检测足细胞 p - mTOR、p -4EBP1、p - p70S6K、p - Akt、synaptopodin 蛋白表达量。结果：(1)CCK -8结果显示，PAN 造成足细胞损伤时加入浓度为3、10 ng／ ml 雷公藤甲素浓度均使足细胞活性上升，10 ng／ ml 时作用最明显(均 P <0．05)。(2)PAN 增加 mTOR、4EBP1、p70S6K、Akt mRNA 及蛋白的表达量，减少 synaptopodin mRNA 及蛋白表达水平(均 P <0．05)。(3)雷公藤甲素共处理细胞后，mTOR、4EBP1、p70S6K、Akt mRNA及蛋白的表达水平明显下降，而 synaptopodin mRNA 及蛋白表达水平明显升高(均 P <0．05)。结论：雷公藤甲素可能通过抑制 mTOR／ p70S6K／4EBP1信号通路，减轻足细胞损伤。