补肾活血方通过调节MGP、BMP-7因子对慢性肾脏病大鼠血管钙化的抑制作用
Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Nephrology(2018)
摘要
目的:观察补肾活血方通过调节基质Gla蛋白(matrix Gla protein,MGP)、骨形态发生蛋白-7(bone morphoge-netic protein-7,BMP-7)因子对慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)大鼠血管钙化(vascular calcification,VC)的抑制作用,探讨补肾活血方抑制CKD大鼠VC的作用机制.方法:60只SD大鼠随机分为正常组、模型组及中药组,每组20只,模型组与中药组大鼠实验第1~4周给予250 mg·kg-1·d-1腺嘌呤混悬液灌胃及含1.8% 高磷饲料喂养,第5~8周腺嘌呤改为隔日灌胃.中药组同时按55 g·kg-1·d-1剂量给予补肾活血方灌胃治疗,每日1次.正常组灌胃等量生理盐水.给药8周后,HE染色观察肾组织变化,茜素红染色观察主动脉钙化结节情况,检测主动脉钙含量及ALP活性,腹主动脉取血检测血清钙(Ca2+)、磷(P3-)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、全段甲状旁腺激素(iPTH),Western blot法检测主动脉 α-平滑肌蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)蛋白的表达,Real-time PCR法检测主动脉MGP、BMP-7mRNA表达.结果:HE染色观察提示:中药组较模型组正常肾小球数目增多,肾小管扩张程度降低,炎性细胞数量下降,腺嘌呤结晶减少.茜素红染色观察提示:与正常组比较,模型组主动脉出现钙化结节,广泛红色颗粒物沉着;与模型组比较,中药组钙化结节减少.与正常组比较,模型组主动脉钙含量及ALP活性升高,血P3-、Scr、BUN、iPTH水平升高,血Ca水平下降(P<0.01),主动脉ALP蛋白表达明显升高、α-SMA蛋白表达明显下降(P<0.01),模型组主动脉MGP、BMP-7 mR-NA表达下调(P<0.01);与模型组比较,中药组主动脉钙含量及ALP活性明显降低(P<0.05),血P3-、Scr、BUN、iPTH水平均下降(P<0.01,P<0.05),血Ca2+水平升高(P<0.01),中药组主动脉ALP蛋白表达降低、α-SMA蛋白表达升高(P<0.01),且中药组MGP、BMP-7 mRNA表达上调(P<0.01).结论:补肾活血方能够改善CKD大鼠肾脏组织学、肾功能、改善钙磷代谢,上调MGP、BMP-7因子表达,这可能是其抑制CKD大鼠VC的作用机制.
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