红景天苷对缺氧肾小管上皮细胞Toll受体2、IL-6表达及其凋亡的影响

Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Nephrology(2016)

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摘要
目的:观察红景天苷(salidroside Sal.)对氯化钴(cobaltous chloride,CoCl2·6H20)诱导的缺氧人肾小管上皮细胞(human kidney tubular epithelia cell,HKC)Toll样受体2(toll-like receptor 2,TLR-2)表达、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的分泌及细胞凋亡的影响.方法:HKC细胞置于六孔板培养,随机分为正常对照组、缺氧模型组、红景天苷(salidroside Sal.)干预组(25 μg/ml、50 μg/ml、100 μml).其中缺氧模型采用300 μmol/L氯化钴处理6h得到,红景天苷干预组在此模型基础上再用不同浓度的红景天苷处理缺氧细胞24h.RT-PCR和Western blot检测TLR-2的表达,ELISA检测各组细胞上清中IL-6含量,流式细胞仪检测缺氧HKC凋亡情况.结果:氯化钴诱导HKC TLR-2蛋白(P<0.05)及RNA表达上调(P<0.01)、IL-6分泌增加(P<0.01)及细胞凋亡增加(P<0.01).25 μg/ml和50 μg/ml的红景天苷能降低缺氧HKC细胞IL-6的水平(P<0.01),50 μg/ml红景天苷抑制作用强于25 μg/ml(P <0.05).与缺氧模型组比较,尽管100 μg/ml红景天苷能降低缺氧HKC细胞IL-6的绝对值水平,但差异无统计学意义(P>0.05).25 μg/ml,50 μg/ml和100 μg/ml红景天苷均能抑制TLR-2蛋白表达(P<0.01),且100 μg/ml较25 μg/ml红景天苷抑制作用显著(P<0.05),但25 μg/ml与50μg/ml、50μg/l与100 μg/ml红景天苷比较,它们抑制作用的强弱差异无统计学意义(P>0.05).三种浓度的红景天苷也能抑制缺氧HKC TLR-2的RNA表达(P<0.0l),50 μg/ml及100 μg/ml红景天苷抑制作用强于25μg/ml红景天苷(P<0.05),但50 μg/ml与100 μg/ml红景天苷比较,二者抑制作用差异无统计学意义(P>0.05).50 μg/ml和100μg/ml红景天苷能抑制缺氧HKC凋亡(P<0.01),但25 μg/ml红景天苷未表现出抑制凋亡的作用(P>0.05),50 μml与100 μg/ml红景天苷比较,两者抑制凋亡的作用差异无统计学意义(P>0.05).结论:红景天苷对缺氧HKC的TLR-2蛋白及RNA表达、IL-6的分泌及细胞凋亡均有抑制作用,但其抑制效应呈现非剂量依赖性.
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关键词
salidroside,inhibit,human kidney tubular epithelial cell,toll-like receptor 2,interleukin-6,apoptosis
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