清脂护肝方对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的作用研究

目的：探讨清脂护肝方对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的作用及其机制。方法58只雄性SD大鼠，均喂养高脂饲料，予以12只作对应。将造模成功的大鼠再随机分为模型组、低剂量、中剂量和高剂量清脂护肝方组，分别给予0．9％NaCl 溶液灌胃，清脂护肝方组予清脂护肝方药液灌胃6周；观察记录大鼠的行为表现及体质量变化。干预结束后次日处死所有大鼠并留取血清和肝脏，检测清脂护肝方对 NASH 大鼠肝生化指标的影响。免疫组织化学方法检测NASH 大鼠肝组织中 SSeCKS、Hck、Lyn、Fgr 的表达水平。体外实验：对库普弗细胞株采用不同浓度不同时间的 CCL4刺激，用优选方案的清脂护肝方药物血清培养后检测 SSeCKS、Hck、Lyn、Fgr 的表达。结果与正常对照组相比，模型组大鼠体重明显增加（P ＜0．05）；模型组 ALT、AST、TBIl 均较正常对照组升高（P ＜0．05）；模型组 TG、CH、LDL 均明显上升（P ＜0．01），HDL 亦有所降低（P ＜0．05）。与模型组相比，中大剂量清脂护肝方组体重均有减轻，其中大剂量组的体重减轻最为明显（P ＜0．01）；清脂护肝方各剂量治疗组 ALT 与模型组比较明显降低（P ＜0．01），大剂量治疗组AST 与模型组比较明显降低（P ＜0．01）；清脂护肝方中、大剂量组的血清 TBIL 较模型组显著下降（P ＜0．01）；与模型组比较，清脂护肝方组的 TG、LDL 有所降低（P ＜0．05），尤其大剂量组降低相对更明显；清脂护肝方各剂量组 CH 有所降低，但仅有大剂量组有统计学差异（P ＜0．05）。ICC 结果表明：Lyn、Hck 在 kupffer 细胞中有表达，并与炎症程度呈正相关，清脂护肝方药物血清培养后表达减少，Fgr 和 SSeCKS 在 kupffer 细胞中无明显表达。ICC 结果表明：Hck、Lyn 在正常肝脏组织中低表达，模型组中高表达，用药组无论是大、中、小剂量组，在抑制 Hck、Lyn 两种 Src 相关激酶成员的阳性表达是有显著效果，特别是大剂量组，与模型组比较有显著意义（P ＜0．01）；模型组 SSeCKS 蛋白的表达显著低于正常组，在治疗组中的表达介于模型组和正常组，同时伴随 Lyn、Hck 表达的升高呈减少趋势，提示 SSeCKS 与 Src 家族相关激酶（Lyn、Hck ）存在某种上下游抑制关系；而清脂护肝方对 Fgr 的表达无明显影响，用药前后无统计学意义（P ＞0．05）。结论清脂护肝方能减轻肝脏的炎性反应，明显改善肝功能和血脂指标，其机制可能与 SSeCKS、Lyn、Hck 信号通路有关，且高剂量时疗效更优。