清脂护肝方对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的作用研究
Chinese Hepatology(2015)
Abstract
目的:探讨清脂护肝方对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的作用及其机制。方法58只雄性SD大鼠,均喂养高脂饲料,予以12只作对应。将造模成功的大鼠再随机分为模型组、低剂量、中剂量和高剂量清脂护肝方组,分别给予0.9%NaCl 溶液灌胃,清脂护肝方组予清脂护肝方药液灌胃6周;观察记录大鼠的行为表现及体质量变化。干预结束后次日处死所有大鼠并留取血清和肝脏,检测清脂护肝方对 NASH 大鼠肝生化指标的影响。免疫组织化学方法检测NASH 大鼠肝组织中 SSeCKS、Hck、Lyn、Fgr 的表达水平。体外实验:对库普弗细胞株采用不同浓度不同时间的 CCL4刺激,用优选方案的清脂护肝方药物血清培养后检测 SSeCKS、Hck、Lyn、Fgr 的表达。结果与正常对照组相比,模型组大鼠体重明显增加(P <0.05);模型组 ALT、AST、TBIl 均较正常对照组升高(P <0.05);模型组 TG、CH、LDL 均明显上升(P <0.01),HDL 亦有所降低(P <0.05)。与模型组相比,中大剂量清脂护肝方组体重均有减轻,其中大剂量组的体重减轻最为明显(P <0.01);清脂护肝方各剂量治疗组 ALT 与模型组比较明显降低(P <0.01),大剂量治疗组AST 与模型组比较明显降低(P <0.01);清脂护肝方中、大剂量组的血清 TBIL 较模型组显著下降(P <0.01);与模型组比较,清脂护肝方组的 TG、LDL 有所降低(P <0.05),尤其大剂量组降低相对更明显;清脂护肝方各剂量组 CH 有所降低,但仅有大剂量组有统计学差异(P <0.05)。ICC 结果表明:Lyn、Hck 在 kupffer 细胞中有表达,并与炎症程度呈正相关,清脂护肝方药物血清培养后表达减少,Fgr 和 SSeCKS 在 kupffer 细胞中无明显表达。ICC 结果表明:Hck、Lyn 在正常肝脏组织中低表达,模型组中高表达,用药组无论是大、中、小剂量组,在抑制 Hck、Lyn 两种 Src 相关激酶成员的阳性表达是有显著效果,特别是大剂量组,与模型组比较有显著意义(P <0.01);模型组 SSeCKS 蛋白的表达显著低于正常组,在治疗组中的表达介于模型组和正常组,同时伴随 Lyn、Hck 表达的升高呈减少趋势,提示 SSeCKS 与 Src 家族相关激酶(Lyn、Hck )存在某种上下游抑制关系;而清脂护肝方对 Fgr 的表达无明显影响,用药前后无统计学意义(P >0.05)。结论清脂护肝方能减轻肝脏的炎性反应,明显改善肝功能和血脂指标,其机制可能与 SSeCKS、Lyn、Hck 信号通路有关,且高剂量时疗效更优。
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Key words
Qingzhi Hugan Prescription,Nonalcoholic steatohepatitis,Liver function,Blood lipids,SSeCKS、Lyn、Hck、Fgr
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