脐带间充质干细胞移植对急性肝功能衰竭的修复及移植途径的优化

目的：探讨脐带间充质干细胞（hUCMSC）移植对急性肝功能衰竭大鼠的治疗作用，并优化移植治疗途径。方法采用组织块贴壁法收集 hUCMSC，流式细胞术检测细胞表面标志物。将 SD 大鼠随机分为经尾静脉注射移植治疗组，经肝叶注射移植治疗组，模型对照组，空白对照组。急性肝衰竭动物模型采用一次性腹腔注射2．5 mL／kg CCl4橄榄油（1∶1）混合溶液建立，24 h 后移植治疗组分别经尾静脉和肝叶注射 hUCMSC 细胞悬液；治疗后0 h、24 h、48 h、72 h、96 h和1周收集血清分析肝功能恢复情况；治疗后3 d、1周、2周留取肝脏标本，观察病理学恢复情况，用 Real-time PCR 检测鼠肝中人 CK8、CK18和 AFP 基因 mRNA 转录水平，免疫组化法检测人 CK18的表达。结果移植治疗组 TBil 和 ALT 含量较模型对照组有明显恢复（P ＜0．05），肝细胞再生程度提高，炎细胞减少，肝脏病理学修复作用增强。在造模后1周、2周时，经尾静脉移植治疗组和经肝叶注射移植治疗组的肝组织中，CK8、CK18和 AFP 基因 mRNA 的相对转录量与模型对照组相比差异有统计学意义（P ＜0．05）。经尾静脉注射移植治疗组和经肝叶移植治疗组中，移植后的 hUCMSC 在鼠肝中诱导分化后表达人肝细胞相关蛋白 CK18。经尾静脉和经肝叶注射移植治疗组的肝功能、移植细胞分化程度比较差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论采用 hUCMSC 移植治疗急性肝衰竭大鼠模型后，能促进肝功能和肝脏病理学修复。移植后的 hUCMSC 自身能分化为具有肝细胞功能的类肝样细胞。经尾静脉与经肝叶注射移植疗效相似。