南蛇藤乙酸乙酯提取物通过活化caspase依赖的线粒体通路诱导HepG2细胞凋亡

目的：通过检测南蛇藤乙酸乙酯提取物在诱导肝癌细胞HepG2凋亡过程中产生的凋亡蛋白表达量探讨其凋亡途径。方法应用Annexin V-FITC与碘化丙啶（promide iodine，PI）双染色法，通过流式细胞技术检测不同浓度（15μg/ml、30μg/ml、60μg/ml、120μg/ml和240μg/ml南蛇藤乙酸乙酯提取物）干预HepG2细胞24小时后的细胞凋亡情况；应用蛋白质印迹法检测不同浓度（30μg/ml、60μg/ml及120μg/ml）南蛇藤乙酸乙酯提取物作用HepG2细胞24小时及60μg/ml和120μg/ml南蛇藤乙酸乙酯提取物作用HepG2细胞48小时后细胞中细胞色素c、裂解的胱冬蛋白原9（cleaved caspase-9）和胱冬蛋白酶3（caspase-3）的表达。结果当南蛇藤乙酸乙酯提取物浓度为15μg/ml、30μg/ml和60μg/ml时，可诱导HepG2细胞出现细胞凋亡，且细胞色素c、裂解的胱冬蛋白原9和caspase-3的表达量增加；随南蛇藤提取物浓度的增加（30μg/ml、60μg/ml及120μg/ml），蛋白表达亦增强。结论南蛇藤乙酸乙酯提取物可能是通过促使膜间蛋白细胞色素c表达和释放活化caspase-9与caspase-3而诱导HepG2细胞的凋亡。