多重交叉置换扩增联合羟基萘酚蓝检测脓肿分枝杆菌方法的建立

目的 建立一种可视化的恒温扩增方法用于检测脓肿分枝杆菌(MAB).方法 采用特异性全长erm (41)基因建立基于多交叉置换扩增(MCDA)结合羟基萘酚蓝(HNB)的方法,通过比色法直接检测扩增产物,采用23株脓肿分枝杆菌复合群和8种细菌标准株对该方法进行初步评价.结果 建立的MAB-MCDA-HNB检测限为100 fg的DNA模板.31株细菌菌株中,只有脓肿分枝杆菌检测结果为阳性,其它细菌包括结核分枝杆菌,卡介苗,马赛分枝杆菌、鸟分枝杆菌等非结核分枝杆菌和金黄色葡萄球菌等均为阴性.脓肿分枝杆菌模拟痰标本检测灵敏度为1.7×103 CFU/mL(每次反应17 CFU).结论 MAB-MCDA-HNB方法能够快速准确诊断脓肿分枝杆菌的感染.