禽多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H受体的初步鉴定

目的 鉴定鸡胚成纤维(CEF)细胞膜禽多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H(OmpH)受体.方法 用膜蛋白提取试剂盒制备CEF细胞的膜蛋白,通过SDS-PAGE和配体印迹检测CEF细胞膜蛋白中的OmpH受体,采用MALDI-TOF质谱技术鉴定蛋白种类,并用配体印迹、ELISA和免疫荧光技术检测OmpH受体在不同宿主食管黏膜细胞表面的分布情况.结果 在转印CEF细胞膜蛋白的NC膜上有一条明显的疑似受体条带,分子量约为49 kDa.MALDI-TOF质谱鉴定结果表明该受体蛋白是ATP合成酶β亚基.在转印鸡和兔食管黏膜细胞膜蛋白的NC膜上检测到能够与OmpH结合的蛋白条带,但在牛和猪食管黏膜细胞膜蛋白中未见任何印迹条带,而OmpH与鸡和兔食管黏膜细胞膜蛋白的结合力高于猪和牛食管黏膜细胞膜蛋白.结论 禽多杀性巴氏杆菌OmpH受体可能是CEF细胞膜表面的ATP合成酶β亚基.