1株猪鼻支原体特异性单克隆抗体的制备及鉴定

目的 制备与鉴定猪鼻支原体单克隆抗体,用于猪鼻支原体诊断及致病机理的研究.方法 将猪鼻支原体全菌蛋白免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体.鉴定其抗体亚型并对纯化单抗的效价、特异性进行鉴定.将该单抗用于菌落免疫杂交试验、间接免疫荧光试验.结果 获得了1株猪鼻支原体单抗,命名为Mhr-08.该单抗的亚型属于IgG1,轻链为κ型.ELISA测定该纯化单抗效价为1∶102 400,Western-blot检测结果表明,该单抗与猪鼻支原体全菌蛋白在43 kDa处出现特异性反应条带,与猪其他支原体、大肠杆菌及KM2培养基无交叉反应;该单抗为猪鼻支原体表面膜蛋白抗体,可成功应用于菌落免疫杂交试验;将其用于间接免疫荧光试验可成功检测出黏附于猪气管上皮细胞上的猪鼻支原体.结论 成功制备和鉴定出1株猪鼻支原体单克隆抗体,该特异性单抗的获得为猪鼻支原体的诊断及致病机理的研究提供了工具.