基于 RNA-Seq 的羊种布鲁氏菌新转录本与非编码 RNA 鉴定

Chinese Journal of Zoonoses(2015)

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摘要
目的:对羊种布鲁氏菌的转录本进行测序,鉴定基因组中新的转录本和非编码RN A。方法提取羊布鲁氏菌的总RNA ,去除rRNA后连接接头逆转录成cDNA ,PCR扩增后进行测序,以羊布鲁氏菌16M的基因组序列为参照对测序得到的reads进行比对作图,通过生物信息学方法进行新转录本和非编码RN A的鉴定。结果测序数据分析显示,reads在基因组上覆盖度较好。与现有注释基因相比,有773个基因的5′或3′端在基因组的原有位置基础上发生了延伸,并发现了16个新的转录本。根据测序结果,共鉴定出241条候选的非编码RNA (sRNA ),进一步的RT‐PCR验证结果显示,预测的sRNA在体外条件下有表达。结论布鲁氏菌基因组中存在除了预测以外的新的转录本,布鲁氏菌中存在非编码RN A且在不同条件下有差异表达。
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关键词
Brucella melitensis,RNA-Seq,transcriptome,sRNA
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