C2株蓝氏贾第鞭毛虫ILP基因的克隆表达及蛋白结构分析

目的 利用大肠杆菌对C2株蓝氏贾第鞭毛虫ILP蛋白(Impact-like protein)进行克隆表达,运用生物信息学软件进行蛋白结构分析.方法 提取C2株蓝氏贾第鞭毛虫基因组DNA,PCR扩增ILP基因,构建pGM-T重组载体,挑选阳性克隆并进行序列分析;将ILP基因连入原核表达载体pET-28a(+),并转化大肠杆菌Rosetta (DE3),IPTG诱导表达.运用PSIPRED和SWISS-MODEL进行蛋白结构分析.结果 成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-ILP,该基因全长831 bp.SDS-PAGE结果显示,目的蛋白条带出现在相对分子量约33 kD的位置,与预期相符.Western blot结果表明,大肠杆菌成功表达了重组蛋白.结论 成功克隆、表达并分析C2株蓝氏贾第鞭毛虫ILP蛋白,为蓝氏贾第鞭毛虫ILP蛋白结构与功能的研究提供了有价值的资料.