马尔尼菲青霉酸性磷酸酶在宿主氧化杀伤中的作用

目的 探讨马尔尼菲青霉(Penicillium marne ff ei,PM)酸性磷酸酶(Acid phosphatase,ACP)在宿主氧化杀伤中的作用.方法 在培养基中加入不同浓度H2 O2模拟氧化应激环境,于25℃和37℃震荡培养后检测上清液中ACP的活性.通过用特定培养基诱导酶分泌、灭活、抑制剂处理的方法获得不同酶活性的PM分生孢子,建立分生孢子与巨噬细胞共培养模型;利用H2 DCFDA标记联合流式细胞术检测巨噬细胞ROS的释放量,CFU及透射电镜观察巨噬细胞对PM的杀伤情况.结果 PM菌丝相及酵母相均能分泌ACP,加入H2O2后两相ACP活性均提高;诱导PM分泌酸性磷酸酶,巨噬细胞ROS释放量及对菌体杀伤能力被抑制;将酶抑制后,巨噬细胞ROS释放量增加,对菌体杀伤能力增强.结论 PM在氧化应激条件下能通过分泌ACP抑制巨噬细胞ROS产生,从而抵御宿主的氧化杀伤作用.