梅毒螺旋体 TprF 蛋白 B 细胞表位的预测与鉴定

目的：预测和鉴定梅毒螺旋体（Tp）膜蛋白TprF氨基端保守区（TprFN ）的优势B细胞表位，为深入研究梅毒多价表位疫苗提供依据。方法从GenBank获取T prFN的氨基酸序列，采用M obyle、ABCpred和IEDB在线软件综合分析预测TprFN的B细胞表位并人工合成多肽；表达重组蛋白 TprFN并经Western blot鉴定后免疫兔，获取血清并测定抗体效价；以TprFN免疫兔血清、梅毒患者血清（设正常人血清和正常兔血清为阴性对照），间接ELISA测定预测的7条人工合成的B细胞表位多肽的免疫反应性和特异性。结果软件综合预测 TprFN的 P1（43‐62AA）、P2（57‐71AA）、P3（81‐88AA）、P4（89‐103AA）、P5（125‐138AA）、P6（231‐251AA）、P7（268‐279AA）可能为B细胞表位；表达一可溶性蛋白，WB鉴定为目的蛋白，其免疫抗体效价为1∶12800以上；ELISA结果显示，预测表位P1、P3与TprFN免疫兔血清及梅毒患者血清均呈阳性反应，而与对照血清均不反应。结论 P1、P3为T prF潜在的优势B细胞表位。