胎盘生长因子基因沉默对胰腺癌 PANC1细胞迁移和侵袭的影响

目的：探讨胎盘生长因子（ PIGF）基因沉默对人胰腺癌PANC1细胞迁移、侵袭能力及化疗药物耐药性的影响。方法设计并合成3个靶向PIGF的siRNA（ siRNA-PIGF），以非特异性的siRNA （ siRNA-NC）作为转染的阴性对照，以未转染细胞作为空白对照。采用脂质体法将siRNA转染PANC1细胞，分别采用实时RT-PCR和ELISA法检测各组细胞PIGF mRNA及蛋白表达抑制率；MTT法检测化疗药物处理对各组细胞的生长抑制率；Transwell 小室检测细胞的侵袭和迁移能力。结果转染3个siRNA-PIGF的 PANC1细胞 PIGF mRNA 表达抑制率分别为（64．38±8．92）％、（70．48±7．72）％、（81．25±6．02）％，以转染siRNA-PIGF-3的基因沉默效应最佳。转染24 h后，siRNA-PIGF组细胞PIGF mRNA表达量较siRNA-NC组下降（63．72±8．20）％，较未转染组下降（75．07±8．25）％，差异均有统计学意义（P 值均＜0．05）；转染48 h 后，培养上清液 PIGF 蛋白含量较 siRNA-NC 组下降（42．92±1．34）％，较未转染组下降（46．25±3．64）％，差异均有统计学意义（P 值均＜0．01），而未转染组和siRNA-NC组间的差异无统计学意义。3 ng／L吉西他滨处理后，siRNA-PIGF组细胞的生长抑制率显著高于siRNA-NC组及未转染组[（44．35±5．05）％比（34．29±3．60）％、（31．01±1．08）％]，差异均有统计学意义（P值均＜0．05），而5-氟尿嘧啶或阿霉素处理后3组的生长抑制率差异无统计学意义。在细胞迁移和侵袭实验中，siRNA-PIGF组穿膜细胞数分别为siRNA-NC组的38．1％、28．2％，为未转染组的40．8％、36．2％，差异均有统计学意义（ P 值均＜0．05）。结论 PIGF 基因沉默能显著抑制胰腺癌PANC1细胞的迁移与侵袭能力，能增强对化疗药物吉西他滨的敏感性。