人胰腺癌编码SUFU蛋白的新剪接体

目的 分析人胰腺癌组织和细胞中Hedgehog信号通路主要成员SUFU蛋白的剪接体.方法 用反转录和3 'cDNA末端快速扩增(3'RACE)法扩增suppresser of fused (SUFU)片段,测序发现一个新的外显子,应用RT-PCR方法扩增全长含新外显子的SUFU(nSUFU).采用脂质体法将nSUFU及SUFU转染SW1990细胞,应用蛋白质印迹法检测SW1990细胞及胰腺癌组织新剪接体编码的蛋白质的表达.结果 通过3'RACE法的第二轮巢式PCR扩增产物约600 bp,经测序并将其序列与NCBI网站Blast序列对比分析发现,在SUFU mRNA isoforml(NM_016169.3)的第10外显子和第1 1外显子之间插入了一个长为126 bp的新外显子.通过对SW1990细胞的验证,包含新外显子的完整的新剪接体片段长约1400bp.转染nSUFU的SW1990细胞强表达nSUFU蛋白,胰腺癌组织既表达SUFU蛋白,又表达nSUFU蛋白.结论 人类胰腺癌组织和细胞中存在一种新的可以编码SUFU蛋白的剪接体.