核干细胞因子增强间充质干细胞心肌保护作用

目的 研究核干细胞因子(nucleostemin,NS)过表达对脂肪来源间充质干细胞(ADSC)移植后的生存和心肌保护作用的影响.方法 分离培养小鼠ADSC,分别转染NS腺病毒(ADSC-NS)和对照腺病毒(ADSC-Con),CM-DiI标记ADSC.制作小鼠心肌梗死(MI)模型,随机分为以下4组:①Sham组(与MI相同操作但不结扎冠脉),②MI+vehicle组(冠脉结扎后,在左心室前壁、侧壁和后壁立即心肌点注射总量20μl PBS),③MI+ ADSC-Con组(心肌点注射20μl含2×105新鲜ADSC-Con的悬液),④MI+ ADSC-NS组(心肌点注射20μl含2×105的新鲜ADSC-NS的悬液).MI3 d后,免疫荧光和流式检测ADSC存活率,TUNEL法检测心肌细胞凋亡.MI 4周后,超声心动图检测心脏结构和功能,MASSON-三色染色测定MI面积,实时定量PCR检测心房钠尿肽(ANP)和脑钠尿肽(BNP)表达水平.在细胞水平将ADSC分为以下各组:①对照腺病毒(ADSC-Con)组,②NS腺病毒(ADSC-NS)组,③对照腺病毒+对照(ADSC-Con+ Con)组,④NS腺病毒+对照(ADSC-NS+ Con)组,⑤对照腺病毒+双氧水(ADSC-Con+H2O2)组,⑥NS腺病毒+双氧水(ADSC-NS+ H2O2)组.检测NS过表达对ADSC增殖、迁移和抗凋亡作用的影响.结果 MI3 d后,与ADSC-Con相比,ADSC-NS显著增加ADSC移植后在心肌组织中的存活率(P＜0.05),显著降低心肌细胞凋亡率(P＜0.05).MI 4周后,ADSC-NS移植显著增加左心室射血分数,降低左心室内径,降低MI面积和ANP、BNP的mRNA表达.在细胞水平,NS过表达促进ADSC增殖和抗凋亡作用,对ADSC的迁移无显著影响.结论 NS过表达通过增加ADSC的增殖和抗凋亡能力,增强ADSC移植对心脏的保护作用.