血管紧张素Ⅱ经酸性鞘磷脂酶/神经酰胺通路致动脉内皮功能障碍的作用

目的 探讨酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASM)/神经酰胺(ceramide,Cer)通路在血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)致动脉内皮功能障碍中的作用和机制.方法 针对对照组,低、中、高剂量AngⅡ组及ASM抑制剂地昔帕明(desipramine,Dpm)组,采用Western blot检测法、实时定量PCR和免疫荧光化学方法检测ASM、Cer、总内皮型一氧化氮合酶(total endothelial nitric oxide synthase,t-eNOS)和磷酸化eNOS(phosphorylated eNOS,p-eNOS)含量变化;采用血管环张力描记技术检测主动脉血管环的舒张功能;采用二氢乙啶(dihydroethidium,DHE)荧光探针检测血管环超氧阴离子(superoxide anion,O2-·)水平.结果 与对照组相比,AngⅡ孵育后主动脉对乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)的舒张反应显著降低(P＜0.05),呈剂量依赖性,对硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)的舒张反应无明显改变;AngⅡ孵育组动脉ASM表达显著增加(P＜0.05),Cer含量显著增多(P＜0.05);ASM抑制剂Dpm可显著抑制AngⅡ所致ASM和Cer改变(P＜0.05),亦可使动脉对Ach的舒张反应恢复正常;AngⅡ可显著降低动脉p-eNOS含量(P＜0.05),增加02-·水平(P＜0.05),Dpm则可使p-eNOS增加(P＜0.05),降低O2-· (P＜0.05).结论 ASM/Cer可能通过抑制eNOS磷酸化并增加O2-·含量介导AngⅡI所致动脉内皮功能障碍.