糖尿病小鼠主动脉平滑肌ROS/NF-κB信号通路对MuRF1介导的BK-β1降解的调控作用

目的 探讨糖尿病小鼠主动脉平滑肌活性氧簇(ROS)/核因子-κB(NF-κB)信号通路对肌肉环指蛋白(Muscle RING finger,MuRF)1介导大电导钙激活钾通道β1亚基(BK-β1)降解的调控机制.方法 腹腔注射链脲霉素制备1型糖尿病小鼠模型,将雄性C57/BL6J小鼠分为6组(每组15只):对照组,对照+N-乙酰半胱氨酸(NAC,ROS清除剂)组,对照+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC,NF-κB抑制剂)组,糖尿病组,糖尿病+NAC组,糖尿病+PDTC组.对照+NAC组和糖尿病+NAC组给予NAC 100 mg/(kg·d)腹腔注射治疗,对照+PDTC组和糖尿病+PDTC组给予PDTC 50 mg/(kg·d)腹腔注射治疗,对照组和糖尿病组给予同等体积的生理盐水腹腔注射.药物治疗12周后,Western blot检测胸主动脉BK-β1、MuRF1、RelA/p65的表达水平;动脉血管舒张反应性实验检测胸主动脉血管环对BK通道的激动剂NS-1619的反应性;酶消化法急性分离小鼠胸主动脉平滑肌细胞,全细胞膜片钳实验技术记录小鼠胸主动脉平滑肌细胞BK通道的电流.结果 与对照组、对照+NAC组和对照+PDTC组相比,糖尿病组的BK-β1的表达显著降低(P＜0.05),MuRF1和RelA/p65的表达显著增加(P＜0.05),胸主动脉血管环对NS-1619的舒张反应性降低(P＜0.05),当刺激电压＞50 mV时,糖尿病组胸主动脉平滑肌细胞BK通道电流显著降低(P＜0.05);与糖尿病组相比,糖尿病+ NAC组和糖尿病+PDTC组的BK-β1的表达显著增加(P＜0.05),MuRF1和RelA/p65的表达显著降低(P＜0.05),胸主动脉血管环对NS-1619的舒张反应性显著改善(P＜0.05),当刺激电压＞ 50 mV时,糖尿病+NAC组和糖尿病+PDTC组胸主动脉平滑肌细胞BK通道电流显著增加(P＜0.05).结论 NAC和PDTC可抑制糖尿病小鼠胸主动脉平滑肌MuRF1介导的BK-β1降解,ROS/NF-κB信号通路可能是参与调控MuRF1介导的BK-β1降解.