两种检测方法应用于城市水源中蓝氏贾第鞭毛虫和隐孢子虫污染的比较研究

目的 用PCR和免疫荧光染色镜检法检测城市现场水源中蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)和隐孢子虫,了解上海市水源地贾第虫和隐孢子虫污染状况. 方法 采集上海市8个区的自来水和3个区的环境水,PCR检测水样本中的贾第虫磷酸丙糖异构酶(triosephosphate isomerase,Tim)基因和隐孢子虫18S rRNA的基因;按《生活饮用水标准检验方法》 (GB5750.12-2006) Filta-Max Xpress快速方法进行免疫荧光染色镜检.计算比较两种方法检测贾第虫和隐孢子虫的阳性率. 结果 共采集200份水样:其中自来水出厂水48份,PCR和荧光镜检法均未检出贾第虫和隐孢子虫;检测原水、动物饲养场周边池水、污水处理厂出水、游泳池水和餐馆养渔池等水样分别为62、25、29、20、16份,PCR法贾第虫阳性率分别为8.1％、36.0％、17.2％、0和0,总阳性率为12.5％;隐孢子虫阳性率分别为6.5％、40.0％、13.8％、0和0,总阳性率为11.8％.免疫荧光染色镜检法贾第虫阳性率分别为9.7％、40.0％、24.1％、0和0,总阳性率为15.1％;隐孢子虫阳性率分别为8.1％、44.0％、17.2％、0和0,总阳性率为13.8％.两种方法检测贾第虫和隐孢子虫一致性分别为96.1％和95.4％,经Kappa检验,两种方法一致性较好(Kappa=0.83和0.79,Kappa＞0.75),PCR与荧光镜检结果无显著性差异(x2=0.44和0.26,P＜0.05). 结论 两种方法均可用于城市现场水源中贾第虫和隐孢子虫污染的调查.自来水未检出贾第虫和隐孢子虫,但在原水和环境水中检测到贾第虫和隐孢子虫污染,需加强监测.