β-catenin基因敲减与Sox9过表达联合对人间充质干细胞早期成软骨分化作用的实验研究

背景:β-catenin基因抑制人间充质干细胞(hMSCs)成软骨分化,而Sox9基因促进hMSCs成软骨分化,但两者联合在hMSCs早期成软骨分化中的作用及其可能机制目前尚不明确.目的:探究β-catenin基因敲减与Sox9过表达联合对hMSCs早期成软骨分化的作用.方法:将骨髓来源hMSCs分为4组:阴性对照组,β-catenin基因敲减组,Sox9过表达组,β-catenin基因敲减与Sox9过表达联合组,加入成软骨分化培养基培养7d.转染24 h,RT-PCR检测β-catenin基因敲减效率与Sox9过表达效率,RT-PCR检测COL2A1和ACAN的mRNA表达量,番红固绿染色、甲苯胺蓝染色、免疫细胞化学检测COL2A1和Aggrecan蛋白.结果:RT-PCR结果显示转染成功,β-catenin基因敲减效率与Sox9过表达效率较高(P＜0.05).β-catenin基因敲减与Sox9过表达联合组中COL2A1和ACAN的mRNA表达量显著高于其他3组(P＜0.05),软骨成分染色更深(P＜0.05).免疫组化结果显示β-catenin基因敲减与Sox9过表达联合组的COL2A1和Aggrecan蛋白表达量显著高于其他3组(P＜0.05).结论:β-catenin基因敲减与Sox9过表达联合对hMSCs早期成软骨分化有促进作用.