大鼠小肠Cajal间质细胞的体外分离、培养及鉴定

目的:探讨大鼠小肠Cajal间质细胞(ICC)的原代分离、培养及鉴定方法.方法:出生后5～10 d的SD乳大鼠,颈椎脱臼处死.无菌条件下取出小肠,在解剖显微镜下剥去小肠系膜、肠黏膜和黏膜下层,将小肠平滑肌层组织剪成小块后接种于含有干细胞因子的DMEM培养基中进行培养.倒置显微镜下连续观察组织块周围细胞的游出情况及细胞的形态,用酪氨酸蛋白激酶受体c-kit特异性抗体免疫荧光染色鉴定细胞类型.结果:培养1周后,倒置显微镜下可见组织块周围长出细胞,呈梭形、三角形,有多个短突起;随着培养时间的延长,突起细长化并彼此相互连接形成网络.该类细胞c-kit抗体免疫荧光染色呈阳性.结论:该研究成功建立了一套由大鼠小肠平滑肌组织块原代培养ICC的方法,为ICC的生物学特性及其与胃肠道动力障碍性疾病关系的研究奠定了基础.