自噬对卡培他滨结肠癌体外化疗效果的影响及机制探讨

目的 探讨卡培他滨对结肠癌细胞的疗效及其与细胞自噬的关系.方法 分别采用卡培他滨(CAP)、卡培他滨+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)、卡培他滨+自噬激活剂雷帕霉素(RAPA)作用于人结肠癌细胞HCT-116及转染mCherry-GFP-LC3自噬双标腺病毒后的HCT-116细胞.MTT、流式凋亡检测法检测不同给药组细胞生长及凋亡的变化;激光共聚焦观察不同给药组细胞内自噬流的变化;Western-blot检测各组细胞内凋亡及自噬相关蛋白的改变.结果 MTT与流式凋亡检测法结果提示相较于单独使用卡培他滨的HCT-116细胞,卡培他滨加用3-MA后细胞凋亡明显增多,而卡培他滨加用雷帕霉素后细胞凋亡出现下降.单独使用卡培他滨后自噬相关蛋白LC3与Beclin-1表达升高,加用3-MA后自噬蛋白表达下降,而加用雷帕霉素后自噬蛋白表达相较单独使用卡培他滨升高;自噬流检测与Western-blot结果提示单独使用卡培他滨可激活结肠癌细胞内的自噬,使用3-MA可抑制卡培他滨对结肠癌细胞的自噬激活效应从而促进结肠癌细胞的凋亡,雷帕霉素可增强卡培他滨对结肠癌细胞的自噬激活效应从而抑制结肠癌细胞的凋亡.结论 自噬的抑制与激活可影响卡培他滨对结肠癌细胞的化疗效果,抑制细胞自噬可增强卡培他滨对结肠癌细胞的化疗效果,而激活细胞自噬可降低卡培他滨对结肠癌细胞的化疗效果.