Yes相关蛋白通过Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞Sox9表达的研究

目的研究Yes相关蛋白（Yes?associated protein, YAP）通过Wnt/β?catenin信号通路调控软骨细胞Sox9表达的机制。方法用siRNA分别沉默YAP基因和Lats1基因来调控YAP的活性，通过Real?time PCR检测软骨特异性基因和Wnt/β?catenin信号通路下游基因的表达；通过Western Blot检测GSK3β的磷酸化水平、活化β?catenin的蛋白水平以及Sox9的蛋白水平；并通过阿利新蓝染色检测软骨细胞外基质的分泌情况。用siRNA沉默YAP基因后，再用氯化锂干预细胞，通过Western Blot检测Sox9的表达和GSK3β的磷酸化水平。结果沉默YAP基因后，磷酸化GSK3β和活化β?catenin的蛋白水平减少，c?Myc和Nanog基因表达减少，Sox9、Col2和Aggrecan基因表达升高，并且软骨细胞分泌基质增多；沉默Lats1基因后，磷酸化GSK3β和活化β?catenin的蛋白水平增加，c?Myc和Nanog基因表达上调，Sox9、Col2和Aggre?can基因表达减少，并且软骨细胞分泌基质减少。此外，氯化锂可以阻断沉默YAP引起的Sox9表达上调。结论 YAP通过Wnt/β?catenin信号通路调控软骨细胞Sox9的表达。