甲胎蛋白对耐药基因MDR1表达及肝癌细胞化疗敏感性的影响

目的 探讨甲胎蛋白(AFP)对耐药基因MDR1表达和肝癌细胞化疗敏感性的影响.方法 建立稳定表达AFP的肝癌细胞系SMMC-7721/AFP,分别通过Real-time PCR和蛋白印迹检测转染前后AFP和MDR1的表达.MTT法测定SMMC-7721/AFP和SMMC-7721/EGFP细胞对阿霉素的化疗敏感性.siRNA沉默SMMC-7721/AFP细胞中MDR1的表达,观察细胞对阿霉素化疗敏感性的变化.采用免疫组织化学染色法检测60例肝癌组织中MDR1编码蛋白PgP的表达,分析Pgp表达与血清AFP水平的相关性.结果 在SMMC-7721/AFP细胞能检测到AFP mRNA和蛋白表达,而对照细胞则未检测到AFP表达,表明AFP稳转细胞系构建成功.SMMC-7721/AFP细胞中MDRl mRNA和蛋白水平明显高于对照细胞,SMMC-7721/EGFP和SMMC-7721/AFP细胞MDRl mRNA水平为对照组的(52.7±1.5)倍(P＜0.05).SMMC-7721/AFP细胞对阿霉素的耐药性增加了(12.8±1.1)倍(P＜0.05).siRNA沉默SMMC-7721/AFP细胞中MDR1的表达后细胞对阿霉素的化疗敏感性明显增强.肝癌组织中Pgp的表达和血清AFP水平呈正相关.结论 AFP可通过上调MDR1的表达引起肝癌细胞对阿霉素耐药.