人参皂苷Rb2在体外调控破骨细胞的作用

目的 探究人参皂苷 Rb2 在体外对破骨细胞的作用及机制.方法 通过培养 RAW264.7 破骨前体细胞,加入不同浓度 Rb2 溶液(0.1 μM,1 μM,10 μM ),采用 CCK-8 检测 Rb2 药物毒性,利用 TRAP 染色观察破骨细胞形态并计数,使用 RT-PCR 方法检测 TRAP、NFATc1 破骨活动特异性基因 mRNA 的表达,通过 Western blot 技术检测破骨细胞中 LC3 I、LC3 II、mTOR 的蛋白表达水平.结果 TRAP 阳性计数,与空白对照组相比(168.2±22.6 ),0.1 μM 组(131.0±16.3 ),P=0.018;1 μM 组(98.8±17.9 ),P<0.01; 10 μM 组( 85.8±17.3 ),P<0.01,破骨细胞数量明显减少.对照组 TRAP、NFATc1 破骨分化特异性基因 mRNA 表达明显下降,与对照组相比各组 P<0.01.LC3 II / LC3 I 的比值显著增高,mTOR 量下降,与对照组相比各组 P<0.01.结论 Rb2 可能通过自噬途径影响破骨基因的表达,从而减少破骨细胞的形成,mTOR 通路在此过程中起重要作用.