膜联蛋白A9在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞SGC-7901增殖能力的影响

目的:探讨膜联蛋白A9(ANXA9)在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖及裸鼠皮下成瘤能力的影响。方法:收集140例胃癌患者的癌组织及其配对的癌旁组织，应用免疫组化染色和qPCR方法检测胃癌及其配对癌旁组织中ANXA9的表达水平，分析其与临床病理参数的关系及对预后的影响。应用慢病毒转染技术抑制胃癌细胞株SGC-7901中ANXA9的表达水平，CCK-8和细胞克隆形成实验检测对SGC-7901增殖能力的变化，流式细胞术检测SGC-7901细胞周期的变化。稳定转染细胞株构建裸鼠皮下移植瘤模型，研究抑制ANXA9对皮下移植瘤的影响。结果:免疫组化染色结果显示：ANXA9在胃癌组织中阳性表达率为67.1%，明显高于癌旁组织的30.7%( t＝31.17, P<0.05)；qPCR检测结果显示：在癌旁组织和胃癌组织中ANXA9 mRNA的表达水平分别为0.142±0.107和0.819±0.191( t＝6.942, P<0.05)。ANXA9高表达组与低表达组在组织分化程度上差异有统计学意义( P<0.05);高表达组和低表达组患者的中位生存期分别为50和59个月( P<0.05)。CCK-8检测结果显示：在人胃癌细胞株SGC-7901中下调ANXA9表达后，转染组细胞的OD值分别为0.285±0.025、0.386 ±0.031、0.711±0.032、1.007±0.084、1.552±0.055和0.274±0.026、0.380±0.049、0.714±0.035、1.106±0.081、1.561±0.060，与对照组的0.294±0.011、0.445±0.046、1.076±0.096、1.588±0.095、2.286±0.110相比增殖能力明显减弱，从48 h开始差异均有统计学意义(均 P<0.05)。干扰组细胞克隆形成数目分别为(207±12)、(225±14)个，少于对照组的(412±14)个，差异有统计学意义( P<0.05)。抑制ANXA9表达后，转染组G 0/G 1期细胞所占比例分别为62.80%和55.87%，比对照组的44.37%明显增加；转染组细胞S期所占比例分别为22.74%、21.44%，与对照组的29.19%相比明显降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。肿瘤裸鼠皮下成瘤结果显示：在稳定干扰ANXA9后，移植瘤的生长速度明显慢于对照组。皮下注射第23天时两组移植瘤平均体积分别为(625±49)mm 3和(303±157)mm 3，两组瘤体组织质量分别为(1.60±0.11)、(0.57±0.09)g，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:ANXA9在胃癌组织中高表达，并与组织分化程度和预后有关；下调ANXA9表达能够抑制胃癌细胞增殖及裸鼠皮下成瘤的能力。