亚低温对脑缺血大鼠海马神经元中类泛素蛋白表达的调控

目的 研究亚低温对大鼠海马神经元中类泛素蛋白(SUMO)表达的调控作用,探索亚低温对脑缺血后神经元的保护机制.方法 原代培养孕龄18 dSD大鼠的海马神经元,培养后12 d,分为对照组、氧糖剥夺(OGD)组、OGD+亚低温组.37℃或亚低温(33℃)条件下培养OGD神经元24h.采用Western blot法检测SUMO-1和SUMO-2/3的表达水平,ELISA法检测乳酸脱氢酶(LDH)含量,原位凋亡法检测凋亡细胞数量.取SD大鼠36只,按完全随机化原则分为假手术组、大脑中动脉阻塞(MCAO)组及MCAO+亚低温组,每组12只.线栓法建立MCAO模型,比较3组模型制作后第1、7、14及21天的神经功能缺损评分;免疫荧光法检测海马区神经元中SUMO-1和SUMO-2/3的表达定位.结果 (1)对照组、OGD组及OGD+亚低温组的LDH分别为(9.85±2.47) pg/L、(586.29±51.56) μg/L、(317.54 ±42.33) pg/L,细胞凋亡率为(0.27±0.05)％、(29.25 ±6.07)％、(17.44±4.59)％,P值均＜ 0.01.3组间游离及共轭SUMO-1蛋白表达水平差异均无统计学意义;与OGD组比较,OGD+亚低温组游离SUMO-2/3的表达水平降低(P＜0.05),共轭SUMO-2/3表达水平升高(P＜0.01),且均高于对照组(P＜0.01).(2)第7、14天MCAO+亚低温组神经功能缺损评分均低于MCAO组(P＜0.05),至第21天两组差异无统计学意义.MCAO组脑梗死面积为(34.51±7.44) mm2,MCAO+亚低温组为(23.67-±5.49) mm2 (P ＜0.05);假手术组、MCAO组及MCAO+亚低温组SUMO-1的表达相近;与假手术组比较,MCAO组细胞核的SUMO-2/3表达明显增高,MCAO+亚低温组增高趋势更明显.结论 大鼠亚低温神经保护机制可能与提高脑缺血后SUMO-2/3与靶蛋白的结合能力有关.