人肝癌组织原代巨噬细胞的提取与鉴定

目的 研究人肝癌组织原代肿瘤相关性巨噬细胞(TAMs)的提取与鉴定方法.方法 收集原发性肝癌患者术中切取的肝癌组织标本15份,免疫组织化学染色方法检测肝癌组织中肿瘤相关巨噬细胞表面标志物CD68及CD206的表达.利用机械法和酶消化法结合分离TAMs,贴壁培养24 h后在倒置显微镜下进行细胞形态学观察,利用CD68和CD206作为标志物,流式细胞术鉴定细胞纯度.结果 癌巢和癌旁组织中均可见CD68、CD206阳性表达,阳性细胞表现为棕褐色;获得一定纯度的原代巨噬细胞,具备巨噬细胞的形态特征,其中CD68单阳性比例为36.29％,CD68和CD206双阳性比例为15.96％.结论 本研究采用的方法可有效提取和培养人肝癌组织来源的原代TAMs,对进一步研究人类肝癌组织TAMs特性及对肿瘤生物学行为的影响具有重要价值.