A型肉毒毒素影响透明质酸钠凝胶酶解反应的实验研究

目的:探讨A型肉毒毒素(Botulinum toxin type A,BTX-A)对透明质酸钠凝胶(Hyaluronic acid,HA)酶解反应的影响.方法:①分别取海薇和润百颜HA凝胶各5份,每份0.05ml,经2％甲苯胺蓝染色,实验组分别加入2.5U、5.0U、10.0U、20.0U BTX-A,对照组加入生理盐水1.0ml(0U BTX-A);再加入300.0U透明质酸酶,显微镜下观察HA凝胶的酶解状态并采集图片,采用Image J软件计算平均光密度值(OD)及其代谢率;②大鼠背部两侧皮下各注射润百颜HA凝胶0.25ml,左侧真皮层注射BTX-A 5.0U,右侧注射生理盐水0.1ml,分别在注射前(0d)、注射后3、7、14、30、60、90d对注射区域皮肤组织取材,检测透明质酸酶-1(HYAL-1)和透明质酸酶-2(HYAL-2)的表达.结果:①在0U、2.5U、5.0U、10.0U BTX-A作用下,随着BTX-A剂量的增加,HA凝胶的代谢率逐渐减小,润百颜分别在60min、70min、80min、100min达到酶解平衡状态,海薇分别在60min、70min、90min、100min达到酶解平衡状态;20.0U BTX-A对HA凝胶的抑制作用与10.0U BTX-A相似,两种HA凝胶均在100min达到酶解平衡状态.相同酶解条件下,在40min后,润百颜较海薇产品代谢速度增快(P<0.001);②注射后3、7d,BTX-A组大鼠皮肤组织中HYAL-1的表达较生理盐水组降低(P<0.05);注射后3、7、14d,BTX-A组HYAL-2的表达较生理盐水组降低(P<0.05).结论:BTX-A对透明质酸酶的活性具有抑制作用,并可降低大鼠皮肤组织中HYAL-1、HYAL-2的表达.