氟对体外培养LS8细胞增殖、氧化应激与凋亡的作用研究

目的:观察氟化物对小鼠成釉细胞样细胞(LS8细胞)增殖、氧化应激以及凋亡的影响.方法:取对数生长期的LS8细胞,在培养液中分别加入终浓度为0、0.5、1、2、4和8mM的氟化钠(NaF)溶液,培养24h和48h后,CCK-8检测细胞增殖;倒置显微镜观察细胞形态;生化方法检测细胞丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;qRT-PCR检测过氧化氢酶(Cat)、谷胱甘肽过氧化物酶1(Gpx-1)和谷胱甘肽S转移酶(Gst)mRNA水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting检测caspase-9和caspase-3蛋白表达改变.结果:过量氟抑制LS8细胞增殖,且随着NaF浓度增加,细胞增殖呈下降趋势;过量氟显著增加LS8细胞内MDA含量,降低SOD活性及Gpx-1、Gst mRNA表达水平;过量氟引起LS8细胞形态改变和细胞凋亡,且伴随着caspase-9,caspase-3表达的显著增加.结论:过量氟抑制LS8细胞增殖,扰乱细胞的氧化与抗氧化平衡并诱发氧化应激,持续的氧化应激最终导致细胞凋亡.