雌激素对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障作用研究

目的：观察雌激素对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障（ blood-brain barrier,BBB)的通透性、Occludin表达的影响,探讨雌激素在脑缺血中的作用。方法随机将去势雌性大鼠分为假手术组、模型组、雌激素预处理组,选取缺血再灌后4 h,24 h,3 d 3个时间点作为观察点,对各个时间点脑水肿情况、Occludin蛋白表达、血脑屏障通透性改变进行考察分析,并选取24 h和3 d作BBB超微结构电镜观察,脑水肿改变情况采用脑含水量百分数测定；蛋白质表达采用western blot方法；血脑屏障通透性改变采用伊文思蓝（EB)比色法。结果与假手术组比较,局灶性脑缺血再灌4 h模型组大鼠脑组织含水量及EB含量均增加（P<0.05),随缺血再灌时间延长,脑组织含水量、脑组织EB含量持续增加,至24 h,达到高峰（P<0.01),与同时间点模型组比较,各治疗组大鼠脑组织含水量、EB含量均有不同程度降低（P<0.05或P<0.01),以24 h组降低最为显著（P<0.01)。电镜观察雌激素预处理组较模型组同时间点比较BBB TJ 开放减轻,星形胶质细胞足突及毛细血管管周水肿较轻,以3 d组显著。 Western blot检测Occludin蛋白表达,发现模型组4 h 时Occludin蛋白表达较假手术组减弱,但无显著性差异（P>0.05),24 h组Occludin蛋白表达较假手术组减弱,有显著性差异（P<0.05),3 d组Occludin蛋白表达进一步减弱,有明显差异（P<0.01),雌激素组4 h时Occludin蛋白表达较同时间点模型组比较无显著性差异（P>0.05),雌激素24 h及3 d组Occludin蛋白表达较同时间点模型组比较均升高,有显著性差异（P<0.05)。结论局灶性脑缺血大鼠动物血脑屏障超微结构可见紧密连接发生断裂,内皮细胞内小泡数量增加及星形胶质细胞足突肿胀,可能是大鼠局脑缺血时血管源性脑水肿的重要因素。大鼠局灶性脑缺血,随缺血再灌时间延长,紧密连接相关蛋白occludin的表达明显下降,提示occludin在调节紧密连接通透性变化的过程中有重要作用。雌激素上调紧密连接Occludin蛋白的表达,有可能是其维护血脑屏障完整性减轻脑水肿的机制之一。