PCSK9对C57BL/6小鼠肾组织脂质平衡及损伤的作用

目的 评估PCSK9(proprotein convertase subtilisin kexin type 9)对C57BL/6小鼠肾脏组织脂质平衡的影响以及损伤作用.方法 12周龄的C57BL/6野生型小鼠和系统性敲除PCSK9基因小鼠通过代谢笼收集24 h尿,经心全身灌注,取出肾脏.采用ELISA方法检测尿微量白蛋白、血尿肌酐、血总胆固醇、肾组织内总胆固醇和甘油三酯水平,BODIPY 493/503染色,透射电镜(TEM)观察肾组织内脂质蓄积;PAS染色、TUNNEL染色以及qPCR和Western印迹法评估肾组织损伤及细胞凋亡.结果 与C57BL/6野生型对照组相比,PCSK9 KO组肾组织内总胆固醇及甘油三酯水平升高(均P<0.05),BODIPY 493/503染色显示肾小球及肾小管细胞内脂质染色明显加深,TEM提示肾小管细胞内脂滴数目显著增多.系统性敲除PCSK9基因小鼠较C57BL/6野生型对照组尿微量白蛋白/尿肌酐升高(P<0.05),Podocin和Nephrin的转录水平下降(均P<0.05),TEM可见肾小球内足细胞足突变短、不同程度的融合.与野生型对照组相比,PCSK9 KO组小鼠肾组织内Bax和Cleaved Caspase 3表达升高,Bcl?2表达下降(均P<0.05).结论 PCSK9表达下降增加肾组织细胞内脂质蓄积,继而诱导肾固有细胞的损伤和凋亡.