活性维生素D3通过PI3K/p-Akt信号通路抑制高糖诱导的足细胞损伤

目的 探讨磷脂酰肌醇3(PI3K)/磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)信号通路在活性维生素D3保护高糖诱导的足细胞损伤中的作用.方法 体外培养小鼠永生系足细胞MPC5,并将其分为5组:正常葡萄糖浓度(NG)组、甘露醇对照(NG+M)组、高糖(HG)组、高糖+不同浓度1,25(OH)2D3(HG+ VD)组(分为0.1、1、10、100、1000 nmol/L组)、高糖+1,25(OH)2D3+PI3K抑制剂LY294002(HG+VD+LY294002)组.观察不同浓度的1,25(OH)2D3及PI3K抑制剂LY294002对高糖条件下培养的足细胞损伤指标的影响.分别采用Western印迹、实时定量PCR和免疫组化等方法检测足细胞裂隙隔膜蛋白nephrin、podocin和足细胞损伤标志蛋白desmin的表达变化,同时检测PI3K、Akt、p-Akt等指标改变.结果 与HG组相比,HG+VD(100、1000 nmol/L)组细胞nephrin、podocin mRNA及蛋白表达明显上调(均P＜ 0.05);HG+VD(100 nmol/L)组Desmin mRNA和蛋白表达明显下调(均P＜ 0.05).与HG组相比,HG+VD(100 nmol/L)组细胞PI3K-p85以及p-Akt蛋白表达降低(均P＜ 0.05).与HG+VD组相比,HG+VD+LY294002组细胞nephrin、podocin蛋白表达明显减少,desmin表达明显升高(均P＜0.05).结论 1,25(OH)2D3能够抑制高糖诱导的足细胞损伤,这一作用可能是通过PI3K/p-Akt信号通路而实现的.